Офтальмик в linked in Офтальмик в твиттере Офтальмик вконтакте Статистика сайта Офтальмик.ру
Генетическая диагностика глазных болезней
.:: Новости ::: О компании ::: Услуги ::: Цены ::: Гены ::: Пациентам ::: Лечение ::: FAQ ::: Контакты ::. 
 
Диагностируем:
· Катаракта
· Глаукома
· Макулярная дегенерация
· Близорукость
· Пигментный ретинит
· Дистрофии сетчатки
· Дистрофии роговицы
· Увеиты
· Ретинобластома
· Амавроз Лебера
· Микрофтальм
· Анофтальм
· Аксенфельда-Ригера
· Ваарденбурга синдром
· Ретиношизис
· Косоглазие
· Выезд окулиста на дом
· Синдром Ашера
· Редкие болезни
 
 
Обучение
· Конференции
· Книги по офтальмогенетике
· Книга О.В. Хлебниковой Наследственная патология органа зрения
· Методы исследования в офтальмологии
· Классификация наследственных болезней сетчатки
· Критерии клинической классификации
· Форум по молекулярной медицине 2013
· Анализ геномных NGS данных
 
 
Пороки развития
· размеров и формы глаза
· придаточного аппарата
· роговицы
· сосудистой оболочки глаза
· хрусталика
· сетчатки
· зрительного нерва
· МУТАНТНЫЕ БЕЛКИ
 
 
Типы диагностики
· CLIA - что это?
· Кариотипирование
· FISH анализ
· SKY тест
· SSDGE или SSCP
· DGGE
· RFLPs
· Специфичный микрочип
· Типичный микрочип
· Прямое секвенирование
 
 
Панели тестов
· Панель "цилиопатии"
· Панель "пигментный ретинит"
· Панель "все глазные заболевания"
· Животные модели
· Пигментный ретинит: новости 2013
· Метаболизм сетчатки
· Дегенерация сетчатки и клеточная биология
 
 

Кариотипирование в офтальмологии - что это и как проводится?

и пренатальный скрининг на болезни глаз

Кариотипирование - процесс изучения строения и количества хромосом, определение выраженных хромосомных аномалий и графическая запись результатов - . было разработано ботаником Григорием Андреевичем Левицким в 1924 году. Хромосомы анализируют с помощью фотокамеры, установленной на световом микроскопе, и анализируют с помощью компьютера с соответствующим программным обеспечением. Хромосомы располагают в определенном порядке и называют кариограммой или идиограммой (центромеры хромосом в каждой паре ставят коротким плечом "р" (от французского слова petit) вверх и нумеруют от 1 до 23.

Клетки (обычно лимфоциты из периферической крови) выращивают в пробирке и обрабатывают специальными методами, поскольку эти клетки не проходят митоз физиологически. Кариотипы обычно анализируют у пациентов с множественными врожденными пороками развития и людей с наличием распространенных хромосомных аномалий, таких как синдром Дауна (трисомия 21) или Патау (трисомия 13), Эдвардса (трисомия 18), Тернера (45, X), Кляйнфельтера (47, XXY), транслокация 9 и 22 хромосомы (филадельфийская хромосома).

Синдром Дауна чаще встречается с увеличением материнского возраста. 92,5% больных имеют 47 хромосом с трисомией 21-й хромосомы. Менее 3% имеют более мягкий фенотип из-за мозаичности, с двумя клеточными линиями (47, XX, +21/46, XX или 47,XY, +21/46, XY ), а примерно 5% имеют 46 хромосом с третьей хромосомой 21 (по существу содержащие участки 21q22.12 - 21q22.3 ) как часть транслокации. В этом случае родители должны пройти кариотипирование для того, чтобы оценить наличие транслокаций у родителей, и, следовательно, вероятность рождения ребенка с такой же аномалией. Глазные проявления включают косой разрез глаз и более часто имеется косоглазие, аномалии рефракции, катаракта (предполагается, что ее появление может быть связано с геном альфа-кристаллина, расположенного в 21 хромосоме) и кератоконуса

Кариотипирование проводят и на амниоцитах, полученных при пренатальном скрининге на хромосомные аномалии у плода. Наиболее распространенными пренатальный анализ проводят, беря 20 - 30 мл амниотической жидкости, амниоцентез обычно проводят между 16 и 18 неделями беременности. Риск смерти плода из-за этой процедуры составляет около 0,5%, если необходим более ранний диагноз, берут трансабдоминальный или трансвагинальный образец ворсин хориона, полученный между 10 и 14 неделями беременности, однако риск смерти плода, связанный с этим подходом в два раза выше: 1.0% Также проводят кордоцентез после 20 недели беременности, однако шанс гибели плода при этой процедуре от 2% до 5%

Анализ кариотипа начинается под световым микроскопом с подсчета количества хромосом и определения центромер, которых должно быть 46 в диплоидных клеток. Так как могут возникать артефакты, необходимо проанализировать 15 - 20 клеток. В спорных случаях оценивают 25 - 50 клеток. Проводят идентификацию каждой хромосомы в зависимости от размера, позиции центромеры и картины диапазонов. Как правило, малые делеции не могут быть обнаружены с помощью этого вида анализа, необходимо посмотреть хромосомы в прометафазе, когда они менее конденсированны , чтобы попытаться увидеть эту малые изменения.

  • Q-окрашивание — окрашивание по Касперссону акрихин-ипритом с исследованием под флуоресцентным микроскопом. Чаще всего применяется для исследования Y-хромосом (быстрое определения генетического пола, выявление транслокаций между X- и Y-хромосомами или между Y-хромосомой и аутосомами, скрининг мозаицизма с участием Y-хромосом)
  • G-окрашивание — модифицированное окрашивание по Романовскому — Гимзе . Чувствительность выше, чем у Q-окрашивания, поэтому используется как стандартный метод цитогенетического анализа. Применяется при выявлении небольших аберраций и маркерных хромосом (сегментированных иначе, чем нормальные гомологичные хромосомы)
  • R-окрашивание — используется акридиновый оранжевый и подобные красители, при этом окрашиваются участки хромосом, нечувствительные к G-окрашиванию. Используется для выявления деталей гомологичных G- или Q-негативных участков сестринских хроматид или гомологичных хромосом.
  • C-окрашивание — применяется для анализа центромерных районов хромосом, содержащих конститутивный гетерохроматин и вариабельной дистальной части Y-хромосомы.
  • T-окрашивание — применяют для анализа теломерных районов хромосом.

Типы генетической диагностики в офтальмологии:

Кариотипирование
флюоресцентная гибридизация in situ, Fluorescence in situ hybridization
Спектральный кариотип spectral karyotype
SSDGE в генетике - single-strand DNA gel electrophoresis (электрофорез в геле одноцепочечной ДНК)
DGGE - denaturing gradient gel electrophoresis денатурирующего градиентного гель-электрофореза
анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов Restriction Fragment Length Polymorphism
Специфичный микрочип
Типичный микрочип
Прямое секвенирование

 

 
 
 
  Как собирать образцы для генетического анализа
Как собирать образцы для генетического анализа
 
  ДНК диагностика глазных болезней в России и СНГ
Мы работаем в России и странах СНГ
 
  Как проводится генетическая диагностика в офтальмологии
Как проводится ген.диагностика
 
  Цены на ДНК диагностику глазных болезней
Из чего складывается цена анализа?
 
  Как правильно рисовать генеалогическое дерево
Как правильно составлять историю здоровья семьи?
 
  секвенирование нового поколения
Используемые нами технологии
 
  клинические признаки при генетической диагностике
Необходимые для ген.анализа клинические данные
 
  Organum visus Голубев Сергей Юрьевич
Информационный партнер проекта
 
  Профессионально о зрении портал OD OS
Информационный партнер проекта
 
 
Copyright © Офтальмик 2008 - 2016